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生物素-三聚乙二醇-二硫-二苯并環(huán)辛炔有哪些應(yīng)用

2025-01-20 [81]
  1. 生物成像領(lǐng)域

    • 生物素可以與抗生物素蛋白(如鏈霉親和素)特異性結(jié)合,這種結(jié)合具有很高的親和力。在細(xì)胞成像中,生物素 - 三聚乙二醇 - 二硫 - 二苯并環(huán)辛炔可以通過生物素部分與標(biāo)記了熒光基團的鏈霉親和素結(jié)合。而二苯并環(huán)辛炔(DBCO)部分則可以和帶有疊氮基團的目標(biāo)生物分子(如細(xì)胞表面蛋白或細(xì)胞器標(biāo)記蛋白等)進行無銅點擊化學(xué)反應(yīng)。例如,在研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的定位和動態(tài)變化時,將帶有疊氮標(biāo)簽的目標(biāo)蛋白與這種化合物連接后,利用熒光顯微鏡可以清晰地觀察到蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。

    • 對于活細(xì)胞成像,由于三聚乙二醇(PEG3)鏈的存在,增加了整個分子的水溶性和生物相容性,使其能夠更好地在細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中發(fā)揮作用,減少對細(xì)胞生理功能的干擾。而且二硫鍵(SS)在一定條件下的可斷裂性,也可以用于設(shè)計在特定細(xì)胞內(nèi)環(huán)境下(如還原環(huán)境較強的線粒體等部位)釋放標(biāo)記分子的成像試劑。

  2. 生物分子標(biāo)記與檢測

    • 用于標(biāo)記生物分子,如蛋白質(zhì)、核酸等。在蛋白質(zhì)標(biāo)記方面,通過化學(xué)合成方法將生物素 - 三聚乙二醇 - 二硫 - 二苯并環(huán)辛炔與目標(biāo)蛋白質(zhì)偶聯(lián)。例如,在酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)實驗中,它可以作為一種新型的標(biāo)記試劑。與傳統(tǒng)標(biāo)記方法相比,DBCO 和疊氮的點擊反應(yīng)具有高效、特異的優(yōu)點??梢詫⑵錁?biāo)記的生物分子用于檢測生物樣品中的抗原或抗體,提高檢測的靈敏度和特異性。

    • 在核酸標(biāo)記領(lǐng)域,這種化合物可以通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)修飾連接到核酸分子上。例如,在核酸適配體(aptamer)的標(biāo)記中,用于后續(xù)對核酸適配體與靶標(biāo)分子(如細(xì)胞表面受體)相互作用的研究,通過檢測標(biāo)記信號來分析核酸適配體的結(jié)合特性。

  3. 藥物遞送系統(tǒng)

    • 藥物 - 連接體 - 靶向分子是構(gòu)建靶向藥物遞送系統(tǒng)的常見模式。生物素 - 三聚乙二醇 - 二硫 - 二苯并環(huán)辛炔中的生物素可以作為靶向部分,例如與腫*細(xì)胞表面過表達的生物素受體結(jié)合。二硫鍵在細(xì)胞內(nèi)的還原環(huán)境(如細(xì)胞質(zhì)中的谷胱甘肽濃度較高)下會發(fā)生斷裂,使得藥物從載體上釋放出來。

    • PEG3 鏈能夠改善藥物載體的血液循環(huán)時間和穩(wěn)定性。藥物可以通過合適的化學(xué)方法連接到這個化合物上,然后通過 DBCO 與帶有疊氮的載體材料進一步組裝,構(gòu)建一個復(fù)雜的藥物遞送體系,將藥物精準(zhǔn)地遞送至病變細(xì)胞,減少對正常細(xì)胞的副作用。

  4. 生物醫(yī)學(xué)材料表面修飾

    • 在生物醫(yī)學(xué)材料(如支架材料、植入材料等)的表面修飾中發(fā)揮作用。例如,在組織工程支架材料表面引入疊氮基團后,利用生物素 - 三聚乙二醇 - 二硫 - 二苯并環(huán)辛炔的 DBCO 部分與之進行點擊反應(yīng),將生物素標(biāo)記到材料表面。

    • 生物素標(biāo)記的材料表面可以進一步結(jié)合其他生物活性分子(如生長因子等),這些分子通過與生物素結(jié)合的鏈霉親和素作為中介連接到材料表面,從而改善材料的生物活性,促進細(xì)胞在材料表面的黏附、增殖和分化,提高組織工程支架的性能。

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